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冻干菌种复苏操作方法

点击次数:4743 发布时间:2019-09-03

技术资料 冻干菌种复苏操作方法


1、检查产品的有效期,按照说明书准备好菌株复苏所需要的75%消毒酒精、废液缸、接种
环、镊子、打火机、酒精灯与培养基平板、斜面。

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2、用75%酒精对产品表面进行消毒。待干,按照瓶蓝盖上箭头方向剥开密封包装。

 


3、调校移液枪(或准备无菌吸管)。吸取配套的复苏液体约300-500uL。

 


4、将复苏液直接添加到冻干菌粉瓶中,用移液枪或吸管反复吸打混匀(注意:吸打时枪头不
能离开液面,避免产生气溶胶)。

 


5、烧环,挑取满一环菌液,划线至试管斜面中(M1,代菌株可以用于保存)。

 

6、烧环,挑取满一环菌液,划线至平板琼脂中(M1,代菌株用于工作实验)。
(备注:同时吸取少量的菌悬液,约50-100uL直接滴加到平板中央,以防划线平板、斜面无法成功复苏)。

 


7、用油性笔写上菌种信息、日期、代数等信息,按说明要求放置于适应温度的培养箱中培养。

 

 

8、将剩余的菌悬液和接种平板、斜面同时培养,如成功复苏,平板和斜面均生长良好。

 

9、注意事项
(1)请开冻干之前检查产品的完整性,是否仍在保质期内。
(2)操作之前必须先详细阅读使用说明书,并准备好需要的培养基和培养条件。
(3)冻干菌粉和配套肉汤均为一次性使用产品,开启后不能再次保存。
(4)如培养之后平板和斜面均无菌生长,请将同时培养菌悬液再次划线新的平板和斜面。
(5)使用之后的剩余产品必须经过生物无害化处理(121℃,灭菌15 分钟灭活。)

 



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