品牌 | 自营品牌 | 货号 | HKE035-02A |
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规格 | 1ml | 供货周期 | 现货 |
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主要用途 | 用于要求保真度比较高,扩增长度较长的PCR反应 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业 |
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英文名称 | 2×Fast?Pfu?Ma-ster?Mix(Quick Load) | | |
产品名称:2×Fast Pfu Master Mix(Quick Load) 中文名称:2倍快速Pfu梅预混液(Quick Load) 产品编号与包装规格: 编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 产品价格 | HKE035-02A | 2×Fast Pfu Master Mix(Quick Load) | 1ml | 2倍快速Pfu梅预混液 | 309 |
产品描述:本制品是将PCR反应所需的Fast Pfu梅、dNTPs、MgCl2、反应缓冲夜以及优化剂以及稳定剂,预先配制成2倍浓度的混合物。2×Fast Pfu Master Mix专为扩增克龙DNA片段优化,高保真,错误率仅为1.3×10-6。使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便。较普通Pfu梅,2×Fast Pfu Master Mix具有快速、高灵敏度、抗干扰强等特点,能获得更理想的扩增结果, 并大幅度缩短扩增反应时间,非常适用于1-20kb长片段的扩增。 产品特点: 高保真:具有同Pfu梅相同的保真度,为普通Taq酶的50倍。 灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。 快速高效:Fast Pfu扩增速度为普通Pfu梅的数倍,72℃保温30 秒可延伸1kb以上,可在较短时间内获得高产量的PCR产物(图例一)。 快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。 产品用途:用于要求保真度比较高,扩增长度较长的PCR反应,包括克龙PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等。 使用建议:(Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端,无3′端"A" 突出,除使用环凯PCR一步定向克龙试剂盒(Cat. No: HKNR001) 外,其它PCR产物的克龙方案有:) 1)PCR前引物进行5′端加磷修饰或将PCR产物麟酸化处理后再直接克龙于平滑末端的载体中。 2)将产物3′末端加A后再与T载体连接。 3)由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度, 理想的引物长度为20-30mers。另外为了减少由3′→5′外切酶活性引起的引物降解,尽量在冰上配制反应体系。 应用实例:图例一)50μL 扩增体系中,λDNA 为模板, 扩增 1kb~20kb 片段。 
泳道 M:λ/Hind III DNAMarker; 泳道 1:1kb; 泳道 2:2kb; 泳 道 3:4kb; 泳 道 4:6kb; 泳道 5:8kb; 泳道 6:10kb; 泳道 7:12kb; 泳道 8:20kb。 保存温度:-20℃。 产品包装(A 包装): 
质量保证:经检测无外源核酸酶残留;qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留;能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。 常用反应体系(50μL): 
常用PCR 循环: 
注意事项: 1)需溶解*后使用,防止离子浓度不均匀。 2)对高GC含量模板,建议将变性温度提高到98℃。 3)对于高GC模板,建议配套使用PCR万neng增强剂 I(Cat.No: HKE055)或者添加终浓度为5%-8% DMSO。 
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